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El papel del estenopo en un microscopio confocal

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¿Por qué se necesita un estenopeico?

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El estenopo es la característica que define a un Microscopio Confocal Raman, proporcionando grandes ventajas en la resolución espacial y el contraste de las imágenes en comparación con un microscopio óptico convencional

¿Por qué se necesita un estenopeico?

Cuando la luz láser es enfocada en una muestra por un microscopio Raman, se forma un volumen de excitación tridimensional dentro de la muestra. Este volumen se conoce como la función de dispersión del punto de excitación (PSF) y en la figura 1a se muestra una representación de su forma. A medida que la luz converge hacia el punto focal, el diámetro de la PSF disminuye, alcanzando un diámetro mínimo limitado por difracción en el plano focal, seguido de un aumento de diámetro a medida que la luz diverge. La forma exacta de la PSF depende en gran medida de las propiedades ópticas de la muestra, como la opacidad en la longitud de onda de excitación, el índice de refracción y la forma en que se dispersa la excitación incidente. La dispersión Raman se producirá a lo largo de todo el volumen de excitación y, por lo tanto, la simple medición del espectro Raman a partir de esta excitación daría lugar a contribuciones espectrales de todo el volumen con una discriminación axial (eje Z) limitada.